Biolumineszenz-Resonanzenergietransfer: Unterschied zwischen den Versionen
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Der '''Biolumineszenz-Resonanzenergietransfer''' (engl. ''Bioluminescence resonance energy transfer'', kurz ''BRET'') ist ein physikalischer Prozess der strahlungsfreien [[Energieübertragung]], der auf dem [[Förster-Resonanzenergietransfer]] (FRET) beruht. Bei diesem Prozess wird [[Biolumineszenz]]energie strahlungsfrei auf einen [[Fluoreszenzfarbstoff]] (Akzeptor-Fluorophor) übertragen. Da die Intensität des Biolumineszenz-Resonanzenergietransfers unter anderem vom Abstand der Biolumineszenzquelle und des Akzeptor-Fluorophors abhängt, wird der Biolumineszenz-Resonanzenergietransfer oft als Alternative zum [[Fluoreszenz-Resonanzenergietransfer]] als „optisches Nanometermaß“ insbesondere in der [[Biochemie]] und der [[Zellbiologie]] eingesetzt.<ref>Pfleger K.D., Eidne K.A. (2006): ''Illuminating insights into protein-protein interactions using bioluminescence resonance energy transfer (BRET).'' In: ''Nat. Methods.'' 3:165-174. PMID 16489332 {{DOI|10.1038/nmeth841}}</ref> Als Biolumineszenzquelle | Der '''Biolumineszenz-Resonanzenergietransfer''' (engl. ''Bioluminescence resonance energy transfer'', kurz ''BRET'') ist ein physikalischer Prozess der strahlungsfreien [[Energieübertragung]], der auf dem [[Förster-Resonanzenergietransfer]] (FRET) beruht. Bei diesem Prozess wird [[Biolumineszenz]]energie strahlungsfrei auf einen [[Fluoreszenzfarbstoff]] (Akzeptor-Fluorophor) übertragen. Da die Intensität des Biolumineszenz-Resonanzenergietransfers unter anderem vom Abstand der Biolumineszenzquelle und des Akzeptor-Fluorophors abhängt, wird der Biolumineszenz-Resonanzenergietransfer oft als Alternative zum [[Fluoreszenz-Resonanzenergietransfer]] als „optisches Nanometermaß“ insbesondere in der [[Biochemie]] und der [[Zellbiologie]] eingesetzt.<ref>Pfleger K.D., Eidne K.A. (2006): ''Illuminating insights into protein-protein interactions using bioluminescence resonance energy transfer (BRET).'' In: ''Nat. Methods.'' 3:165-174. PMID 16489332 {{DOI|10.1038/nmeth841}}</ref> Als Biolumineszenzquelle finden insbesondere das Enzym ''Rluc'', eine [[Luciferase]] aus der [[Seefedern]]art ''[[Renilla reniformis]]'' (gemeine Seefeder), unter Verwendung ihres Substrats [[Coelenterazin|Coelenterazin h]] und als Akzeptor-Fluorophor das gelb fluoreszierende Protein [[YFP]] Anwendung. Eine Weiterentwicklung dieser klassischen BRET-Methode ist die BRET<sup>2</sup>-Methode, die auf der Verwendung des Substrats Coelenterazin 400a (DeepBlue C) und des Akzeptors GFP<sup>2</sup> beruht.<ref>Dionne P., Mireille C., Labonte A., Carter-Allen K., Houle B., Joly E., Taylor S.C., Menard L. (2002): ''BRET2: Efficient energy transfer from Renilla Luciferase to GFP2 to measure protein–protein interactions and intracellular signaling events in live cells.'' In: ''Luminescence Biotechnology: Instruments and Applications.'' (van Dyke K., van Dyke C., Woodfork K., ed), S. 539–555, CRC Press, Boca Raton, USA.</ref> | ||
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Aktuelle Version vom 2. August 2020, 08:51 Uhr
Der Biolumineszenz-Resonanzenergietransfer (engl. Bioluminescence resonance energy transfer, kurz BRET) ist ein physikalischer Prozess der strahlungsfreien Energieübertragung, der auf dem Förster-Resonanzenergietransfer (FRET) beruht. Bei diesem Prozess wird Biolumineszenzenergie strahlungsfrei auf einen Fluoreszenzfarbstoff (Akzeptor-Fluorophor) übertragen. Da die Intensität des Biolumineszenz-Resonanzenergietransfers unter anderem vom Abstand der Biolumineszenzquelle und des Akzeptor-Fluorophors abhängt, wird der Biolumineszenz-Resonanzenergietransfer oft als Alternative zum Fluoreszenz-Resonanzenergietransfer als „optisches Nanometermaß“ insbesondere in der Biochemie und der Zellbiologie eingesetzt.[1] Als Biolumineszenzquelle finden insbesondere das Enzym Rluc, eine Luciferase aus der Seefedernart Renilla reniformis (gemeine Seefeder), unter Verwendung ihres Substrats Coelenterazin h und als Akzeptor-Fluorophor das gelb fluoreszierende Protein YFP Anwendung. Eine Weiterentwicklung dieser klassischen BRET-Methode ist die BRET2-Methode, die auf der Verwendung des Substrats Coelenterazin 400a (DeepBlue C) und des Akzeptors GFP2 beruht.[2]
Einzelnachweise
- ↑ Pfleger K.D., Eidne K.A. (2006): Illuminating insights into protein-protein interactions using bioluminescence resonance energy transfer (BRET). In: Nat. Methods. 3:165-174. PMID 16489332 doi:10.1038/nmeth841
- ↑ Dionne P., Mireille C., Labonte A., Carter-Allen K., Houle B., Joly E., Taylor S.C., Menard L. (2002): BRET2: Efficient energy transfer from Renilla Luciferase to GFP2 to measure protein–protein interactions and intracellular signaling events in live cells. In: Luminescence Biotechnology: Instruments and Applications. (van Dyke K., van Dyke C., Woodfork K., ed), S. 539–555, CRC Press, Boca Raton, USA.
en:Förster resonance energy transfer#BRET